1. 怎么找c-myc的pcr引物设计
PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列.因此,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否.
要设计引物首先要找到DNA序列的保守区.同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构.如这个区域单链能形成二级结构,就要避开它.如这一段不能形成二级结构,那就可以在这一区域设计引物.
现在可以在这一保守区域里设计一对引物.一般引物长度为15~30碱基,扩增片段长度为100~600碱基对.
让我们先看看P1引物.一般引物序列中G+C含量一般为40%~60%.而且四种碱基的分布最好随机.不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在.否则P1引物设计的就不合理.应重新寻找区域设计引物.
同时引物之间也不能有互补性,一般一对引物间不应多于4个连续碱基的互补.
引物确定以后,可以对引物进行必要的修饰,例如可以在引物的5′端加酶切位点序列;标记生物素、荧光素、地高辛等,这对扩增的特异性影响不大.但3′端绝对不能进行任何修饰,因为引物的延伸是从3′端开始的.这里还需提醒的是3′端不要终止于密码子的第3位,因为密码子第3位易发生简并,会影响扩增的特异性与效率.
综上所述我们可以归纳十条PCR引物的设计原则:
① 引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性.
② 产物不能形成二级结构.
③ 引物长度一般在15~30碱基之间.
④ G+C含量在40%~60%之间.
⑤ 碱基要随机分布.
⑥ 引物自身不能有连续4个碱基的互补.
⑦ 引物之间不能有连续4个碱基的互补.
⑧ 引物5′端可以修饰.
⑨ 引物3′端不可修饰.
⑩ 引物3′端要避开密码子的第3位.
PCR引物设计的目的是找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列.如前述,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否.对引物的设计不可能有一种包罗万象的规则确保PCR的成功,但遵循某些原则,则有助于引物的设计.
1.引物的特异性
引物与非特异扩增序列的同源性不要超过70%或有连续8个互补碱基同源.
2.避开产物的二级结构区
某些引物无效的主要原因是引物重复区DNA二级结构的影响,选择扩增片段时最好避开二级结构区域.用有关计算机软件可以预测估计mRNA的稳定二级结构,有助于选择模板.实验表明,待扩区域自由能(△G°)小于58.6lkJ/mol时,扩增往往不能成功.若不能避开这一区域时,用7-deaza-2′-脱氧GTP取代dGTP对扩增的成功是有帮助的.
3.长度
寡核苷酸引物长度为15~30bp,一般为20~27mer.引物的有效长度:Ln=2(G+C)+(A+T+,Ln值不能大于38,因为>38时,最适延伸温度会超过Taq DNA聚合酶的最适温度(74℃),不能保证产物的特异性.
4.G+C含量
G+C含量一般为40%~60%.其Tm值是寡核苷酸的解链温度,即在一定盐浓度条件下,50%寡核苷酸双链解链的温度,有效启动温度,一般高于Tm值5~10℃.若按公式Tm=4(G+C)+2(A+T)估计引物的Tm值,则有效引物的Tm为55~80℃,其Tm值最好接近72℃以使复性条件最佳.
5.碱基础随机分布
引物中四种碱基的分布最好是随机的,不要有聚嘌呤或聚嘧啶的存在.尤其3′端不应超过3个连续的G或C,因这样会使引物在G+C富集序列区错误引发.
6.引物自身
引物自身不应存在互补序列,否则引物自身会折叠成发夹状结构牙引物本身复性.这种二级结构会因空间位阻而影响引物与模板的复性结合.若用人工判断,引物自身连续互补碱基不能大于3bp.
7.引物之间
两引物之间不应不互补性,尤应避免3′端的互补重叠以防引物二聚体的形成.一对引物间不应多于4个连续碱基的同源性或互补性.
8.引物的3′端
引物的延伸是从3′端开始的,不能进行任何修饰.3′端也不能有形成任何二级结构可能,除在特殊的PCR(AS-PCR)反应中,引物3′端不能发生错配.
在标准PCR反应体系中,用2U Taq DNA聚合酶和800μmol/L dNTP(四种dNTP各200μmol/L)以质粒(103拷贝)为模板,按95℃,25s;55℃,25s;72℃,1min的循环参数扩增HIV-1 gag基因区的条件下,引物3′端错配对扩增产物的影响是有一定规律的.A∶A错配使产量下降至1/20,A∶G和C∶C错七下降至1/100.引物A:模板G与引物G:模板A错配对PCR影响是等同的.
9.引物的5′端
引物的5′端限定着PCR产物的长度,它对扩增特异性影响不大.因此,可以被修饰而不影响扩增的特异性.引物5′端修饰包括:加酶切位点;标记生物素、荧光、地高辛、Eu3+等;引入蛋白质结合DNA序列;引入突变位点、插入与缺失突变序列和引入一启动子序列等.
10.密码子的简并
如扩增编码区域,引物3′端不要终止于密码子的第3位,因密码子的第3位易发生简并,会影响扩增特异性与效率.
特殊目的的引物设计将在有关章节讨论.随着人们对引物的认识,一些引物的计算机设计程序也应运而生,下面将讨论有关引物计算机设计方法.
现有的引物设计软件有primer5.0比较好.
2. 衣服吊牌上myc是什么牌子
1】有些企业喜欢用简称,特别是汉字的首字母来缩写
2】真正懂得运营品牌的企业,他们都会去注册自己的商标,再来打造相应的品牌
3】假如都没有识别度,只能说“放弃吧,让自己轻松一些”
附图:简单明了的服装吊牌效果
3. design是什么牌子
design并未注册品牌。
design 英[dɪˈzaɪn] 美[dɪˈzaɪn]
n. 设计; 布局; 安排; 设计艺术; 构思; 设计图样; 设计方案。
v. 设计; 制图; 构思; 计划; 筹划; 制订; 制造; 意欲。
[例句]They wanted todesigna machine that was both attractive andpractical.
他们想设计一种既美观又实用的机械。
(3)mycdesign是什么女装扩展阅读
1、fashion design
英[ˈfæʃn dɪˈzaɪn] 美[ˈfæʃn dɪˈzaɪn]
[词典] 服装设计专业; 流行设计; 时装设计; 服装设计; 时尚设计;
[例句]She came to London in 1960 to studyfashiondesign.
她1960年来到伦敦学习时装设计。
2、landscape design
英[ˈlændskeɪp dɪˈzaɪn] 美[ˈlændskeɪp dɪˈzaɪn]
[词典] 庭园(造园、园林、景观)设计;
[例句]Landscape materials continuously enriched, it promoted the innovation and development of concept and practice inlandscapedesign.
景观材料的不断丰富,推动了景观设计理念和实践的不断创新和发展。
3、package design
英[ˈpækɪdʒ dɪˈzaɪn] 美[ˈpækɪdʒ dɪˈzaɪn]
[词典] 包装设计;
[例句]We need a logo andpackagedesignthat captures the essence and concept of theCompany.
我们需要一个标志和包装设计,抓住了本质和公司的理念。
4. DESIGNICE是什么牌子
迪赛尼斯。始创于1999年。
杭州迪赛尼斯女装有限公司是一家集服装设计、生产、销售于一体的专业女装公司。旗下主打品牌DESIGNICE产品涉及服装、鞋类、箱包、围巾、饰品等。自1999年推向市场以来,公司一致着力于把时尚着衣文化带给众多优雅女性。
经过公司多年的发展及品牌的推广,至今在全国拥有150多家专营店及代理商,年生产能力达70万件以上。
(4)mycdesign是什么女装扩展阅读
品牌的主营业务是丹宁布产品的销售。
根据时尚工业杂志Women's Wear Daily的数据,全球有700多个丹宁布品牌。如True Religion,Seven for all Mankind,Chip and Pepper以及Paper Denim & Cloth等品牌一样,Diesel也是其中的一员。
Diesel商标也授权给其他公司用于生产鞋类、皮具、眼镜、珠宝、手表(授权公司:Fossil)、香水(授权公司:莱雅)和其他的男女饰品。2007年2月,公司涉足内衣和沙滩装业务。授权公司为美国公司Mast Instries Inc.,此公司也为维多利亚的秘密生产女性内衣。
5. 为什么在百度搜索不到MYCXIV,迈凯西威女装
有可能度度没有将中服网的信息给过渡到自己的网页当中。自然就查不到信息。
6. fashion design是什么意思
Fashion Design
时装设计, 流行(时尚)设计
一下附上牛津英汉汉英词典的解释:
fashion |ˈfæʃn|
A.noun
①Uncountable and countable(vogue, trend)时尚
in/out of fashion
正在/不再流行
the latest fashion
最新的时尚
to be a slave to fashion
拼命赶时髦
to be all the fashion
风行一时
ladies' fashions
新款女装
②(manner)方式
after a fashion
还算可以
B.modifier
流行的 ‹accessory, jewellery›
C.transitive verb
①(mould)使…成形 ‹clay, wood›
to fashion [something] into [something]
把某物做成某物
②(create)制作 ‹bowl, figure›
to fashion [something] out of or from [something]
用某物制作某物
design |dɪˈzaɪn|
A.noun
①Countable and uncountable(arrangement, conception)设计
a design for or of [something]
某物的设计
to be of faulty/poor design
设计有问题/很差
②Uncountable(art of designing)设计艺术
interior/theatre/instrial design
室内/舞台/工业设计
③Countable(drawing, sketch, diagram)设计图
a set of designs for [something]
为某物设计的一套图样
④Countable(decorative pattern)图案
⑤Countable(model, completed object)款式
this season's new designs
本季新款
⑥Countable and uncountable(intention)意图
to have designs on [somebody]/[something]
企图占有某人/某物
to have designs against [somebody]
算计某人
by design
故意地
B.transitive verb
(conceive, plan out, sketch)设计
to design [something] as [something]
把某物设计成某物
to be well/badly designed
设计得好/不好
a jug designed to hold or for holding water
设计用来盛水的罐子